Benchmarks

استاندارد ملی ایران شماره ۲۱۱۹۷ سال ۱۳۹۵

چندین آزمایش تعیین می‌شود. وجود تحرک الکتروفورتیک برای بدست آوردن نتایج مناسب لازم بوده و وابسته به قدرت میدان است. بنابراین، برای دستیابی به پاسخ مربوط به تحرک الکتروفورتیک که متمایز از حرکات نفوذی ساده است، ولتاژ افزایش می‌یابد که منجر به افزایش قدرت میدان و در ادامه تحرک الکتروفورتیک و پاسخ سیستمی می‌شود. البته افزایش ولتاژ با مشکل افزایش احتمال واسرشت پروتئین از طریق شکست پیوند دی سولفیدی، حذف گروه آمین طی واکنش آمین زدایی، اکسیداسیون زنجیره جانبی هیستیدین به آسپارتیک اسید در سطح الکترود فلزی همراه است. کلیه این فرآیندها باعث تغییر بار کلی مولکول به مقادیر منفی شده و همزمان منجر به تغییرات شدید ساختاری، استحکام، پایداری و غیره در پروتئین می‌شود. در حالت ایده آل اندازه‌گیری باید تحت شرایطی انجام شود که نمونه هرگز در تماس با الکترود قرار نگیرد.

۳-۲-۷ پیشنهاد می‌شود مواقعی که دستگاه برای مدت طولانی استفاده نمی‌شود، قسمت‌های غیرقابل تعویض سیستم مرطوب نگه‌داشته شود (ابتدا با محلول حاوی فعال کننده سطحی غیریونی شسته شده و سپس در آب دوبار تقطیر و دیونیزه نگهداری شود).

۷-۳ ورود نمونه به دستگاه

۷-۳-۱ ابتدا دستگاه را براساس روش تنظیم و دستور کار شرکت سازنده راه‌اندازی و تنظیم کنید. در صورت لزوم نمونه را فیلتر و رقیق کنید. کلیه اطلاعات لازم در مورد نمونه ثبت و مستندات را تهیه کنید. بعد از تمیز کردن ظرف نگهداری، مقدار کمی از نمونه را وارد دستگاه کنید. در مواردی خاص و برای جلوگیری از ته‌نشینی مواد درشت و تداخل در اندازه‌گیری‌ها می‌توان نمونه را از فیلتر مناسب عبور داده و سپس اندازه‌گیری کرد. توجه داشته باشید تا زمانی که به سیستم میدان الکتریکی اعمال می‌شود مواد به صورت سوسپانسیون باقی می‌مانند. بنابراین مقدار حد بالایی پتانسیل زتای ذرات درشت بزرگتر از حرکت دینامیکی براونی اندازه‌گیری شده با استفاده از سیستم تفرق نور پویا (DLS) است. پیش از اعمال ولتاژ، زمان کافی برای تنظیم و به تعادل رسیدن دما (معمولاً ۲ دقیقه کافی است) درنظر بگیرید.

۷-۴ اندازه‌گیری

۷-۴-۱ برای دستیابی به نتایج تکرارپذیر بهتر است آزمایش‌ها در گروه‌هایی با تعداد کمتر انجام شوند. همچنین برای جلوگیری از افزایش دمای سیستم بخاطر محیط یونی، آزمایش‌ها را با فواصل زمانی مناسب انجام دهید. به تولید حباب و سیاه‌شدن سطح الکترود توجه کنید. برای دستیابی به نتایج مناسب، رقت، فواصل زمانی و ولتاژ مناسب را انتخاب کنید. برای این کار می‌توانید چند آزمایش اولیه انجام و با استفاده از محاسبه ضریب قابل قبول از پیش تعریف شده ( $(\; ext\{انحراف\; معیار\}/\; ext\{میانگین\})\; imes\; 100$ ) برای گروه‌های اندازه‌گیری پی‌درپی مقادیر مناسب را انتخاب کنید.

۷-۴-۲ نمونه‌ها و ظروف آنها را با شرایط مناسب امحا کنید.

۱۶